双缩脲试剂鉴定蛋白质原理
【双缩脲试剂鉴定蛋白质原理】
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蛋白质的肽键与双缩尿类似，可与铜离子在碱性环境下(双缩尿试剂)生成紫色络合物.稀氢氧化铜溶液(斐林试剂)有弱氧化性可与还原性糖中的醛基发生反应 ， 生成砖红色的氧化亚铜沉淀 。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂 。它是一种碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1 g/mL氢氧化钠或氢氧化钾、0.01 g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制而成 。扩展资料双缩脲反应主要涉及肽键，因此受蛋白质特异性影响较小 。且使用试剂价廉易得，操作简便，可测定的范围为1～10mg蛋白质，适于精度要求不太高的蛋白质含量的测定，能测出的蛋白质含量须在约0.5mg以上 。可通过比色法分析浓度 ， 在紫外可见光谱中的波长为540nm 。双缩脲法的缺点是精确度低、所需样品量大 。干扰此测定的物质包括在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液 ， 因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀 。参考资料来源：百度百科-双缩脲试剂
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