基因组 DNA 分离丨Worthington核糖核酸酶A


基因组 DNA 分离丨Worthington核糖核酸酶A


胰腺核糖核酸酶 (RNase)是一种核糖核酸内切酶 。 它催化核苷酸的5'-核糖和与相邻嘧啶核苷酸的3'-核糖相连的磷酸基团之间的磷酸二酯键的断裂 。 这种切割形成2'3'-环状磷酸盐 , 然后水解成相应的3'-核苷磷酸盐 。
RNase在反刍动物胰腺中的含量最高(Barnard 1969) 。 结晶酶的主要成分是RNase A;一个次要成分是RNase B 。 RNase B是RNase A的糖基化形式(Beintema et al. 1976) 。
艾美捷Worthington核糖核酸酶A特异性:
RNase A对嘧啶核苷键具有特异性(Volkin和Cohn 1953) 。 据信该反应分两步进行 。 在步中 , 3'5'-磷酸二酯键被裂解 , 同时生成2'3'-环状磷酸二酯中间体 。 第二步 , 环状磷酸二酯水解成3'-单磷酸基团 。 步对于底物的含氮碱基是非特异性的;然而 , 第二步对于末端为2'3'-环状磷酸的嘧啶核苷酸是特异的 。 RNase B对环状胞苷酸和酵母RNA具有与RNase A相同的特异性(Plummer和Hirs 1963) 。 RNase A显示出对较大底物的偏好(Nogués等 , 1995) 。
该酶在胞苷残基处的裂解速度是尿苷残基处的两倍(Richards和Wyckoff 1971) 。 已发现Thr45通过与嘧啶碱基形成氢键和在空间上排除嘌呤碱基对介导嘧啶特异性最重要(del Cardayré和Raines 1994) 。 Asp83的侧链对于稳定含尿苷底物裂解过程中的过渡态很重要;该残留物对胞苷裂解的动力学没有影响(del Cardayré和Raines 1995) 。

 艾美捷Worthington核糖核酸酶A的7个应用:
1.DNA分离过程中的RNA去除
2.RNA序列分析
3.RNase保护试验
4.RNA定量或作图
5.纯化质粒DNA
6.基因组DNA分离
7.分子量标记
艾美捷Worthington核糖核酸酶A参考文献:
1.Admed A. Schaffer S. and Wetlaufer D.: Nonenzymic Reactivation of Reduced Bovine Pancreatic Ribonuclease by Air Oxidation and by Glutathione Oxidoreduction BuffersJ Biol Chem 250 8477 1975
2.Ahmad F.: Free Energy Changes in Denaturation of Ribonuclease A by Mixed Denaturants. Effects of Combinations of Guanidine Hydrochloride and One of the Denaturants Lithium Bromide Lithium Chloride and Sodium BromideJ Biol Chem 259 4183 1984
3.Ahmad F.: Free Energy Changes in Ribonuclease A Denaturation. Effect of Urea Guanidine Hydrocholoride and Lithium Salt J Biol Chem 258 11143 1983
Worthington核心酶:包括:胶原蛋白酶 , 脱氧核糖核酸酶I , 弹性蛋白酶 , 木瓜蛋白酶 , 核糖核酸酶 , 胰蛋白酶等 。
【基因组 DNA 分离丨Worthington核糖核酸酶A】Worthington主要研究覆盖生物技术和生命科学研究 , 诊断 , 生物制药和生物加工应用的高质量纯化酶 , 蛋白质 , 核酸和试剂盒 。 艾美捷科技是Worthington的中国代理商 , 为科研工作者提供优质的产品与服务 。

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