医学分子生物学-整理笔记( 三 )


细胞与细胞间的通讯方式;①细胞间隙连接通讯 。 ②膜表面分子接触通讯 。 ③化学信号介导的通讯 。
受体的作用、特点及分类;受体有两个方面的作用:一是识别外源信息分子 , 二是将配体的信号进行转换 , 传递至其它分子 , 引起细胞的应答 。 受体的特点:高度特异性、高亲和力、可饱和性、可逆性  受体按照其在细胞内的位置分类:细胞表面受体和细胞内受体
负责信号在细胞内传递与转换的信号转导分子;
蛋白激酶和蛋白磷酸酶:蛋白质活性的开关系统(磷酸化和去磷酸化)
G蛋白:GTP/GDP开关作用 。
信号转导复合物:由衔接蛋白和支架蛋白形成
G蛋白偶联受体信号转导途径的基本步骤;
①配体与受体结合②受体活化G蛋白③G蛋白激活或抑制效应分子④效应分子改变第二信使的含量与分布⑤第二信使作用于相应的靶分子 , 使之构象改变 , 从而改变细胞的代谢过程及基因表达等功能 。
胰岛素受体介导的信号转导的主要步骤 。
①受体二聚体的形成及其磷酸化②募集街头蛋白Grb2③Grb2的SH3募集SOS④Ras的活化⑤MAPK的级联激活⑥转录因子的磷酸化及其转录调控作用
细胞周期——大多数真核细胞经过一系列有序事件 , 使细胞体积增大 , 染色体复制 , 并且分裂成两个各含有一套完整的染色体的子代细胞
细胞凋亡——是机体细胞在正常生理或病理状态下发生的一种自发的程序化死亡过程 。
细胞周期及细胞周期中的关卡;
细胞周期四个时期:G1期 , S期 , G2期 , M期
四个关卡:G1晚期的限制点 , G1-S转折和G2-S转折的DNA损伤关卡 , 有丝分裂中期关卡(又称纺锤体组装关卡)
细胞周期中关卡的作用;
G1晚期限制点:监控G1期细胞大小及环境中是否有生长因子 , 细胞生长大足够大;
G1-S处关卡:监控DNA是否损伤;
G2-M处关卡:监控DNA是否损伤及DNA是否已正确、完全的复制;
有丝分裂中期关卡:监控姐妹染色体是否已稳定地附着在纺锤体上 。
细胞周期的调控蛋白质;
(1)周期蛋白;(2)周期蛋白依赖性激酶;(3)周期蛋白-周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CKI);(4) RB及E2F-DP1转录因子;(5)调节Cdk磷酸化和去磷酸化的蛋白激酶和磷酸酶;(6)泛素和使蛋白质泛素化的酶 。
凋亡途径中的胱天蛋白酶级联反应;
Egl----抑制---Ced9---抑制---Ced4---活化---Ced3---凋亡
细胞调亡的形态学变化;
由于细胞缩小而丧失与周围细胞接触 , 染色质固缩在核膜附近 , 细胞骨架崩解 , 核膜消失 , DNA断裂成片段 , 细胞膜起泡 , 最终细胞解体为许多由细胞膜包裹的凋亡小体 , 并被周围的健康细胞或吞噬细胞吞噬 。
细胞凋亡与细胞死亡的区别 。
最重要的区别就是凋亡过程中细胞内的物质自始自终并无外流 , 很少引起炎症反应;坏死过程中细胞肿胀、破裂、内容物外流而导致炎症反应 ,
基因工程:将基因进行克隆 , 利用克隆基因表达 , 制备特定的蛋白或多肽产物或定向改造细胞乃至生物个体特性所用的方法及相关工作 。
DNA重组:不同来源的DNA分子通过末端共价连接 , 形成重新组合的DNA分子的过程 。
克隆载体:携外源DNA入宿主细胞实现外源DNA的克隆和扩增的载体 。
质粒:存在于包括细菌 , 酵母在内的多种微生物中 , 在宿主细胞的染色体外以稳定的方式遗传 。
转化:指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主菌 , 并使其获得新的表型的过程 。
转导:用噬菌体或细胞病毒介导的遗传信息的转移过程 。
转染:真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的表型过程 。
表达系统:通过导入目的基因从而获得所需要的蛋白或多肽片段 , 包括表达载体及表达构件 。
限制性核酸内切酶及其识别位点特征:具有回文序列结构
质粒载体应该具备的特性:1.分子量相对较小 , 能在细菌内稳定存在 , 有较高的拷贝数 。 2.具有一个以上的遗传标志 。 3.具有多个限制性内切酶的单一切点 , 便于外源基因的插入 。
基因工程技术的基本过程:1.制备目的基因和相关载体 。 2.将目的基因和有关载体进行连接 。 3.将重组的DNA导入受体细胞 。 4.DNA重组体的筛选和鉴定 。 5.DNA重组体的扩增 , 表达和其他研究 。
表达载体:用来在受体细胞中表达(转录和翻译)外源基因的载体 。
基因组文库:指将某种生物的整个基因组DNA切割成大小合适的片段 , 并将所有这些片段都与适当的载体连接 , 引入相应的宿主细胞中保存和扩增所获得的重组子群体的总称 。

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