翻译起始时 ， 第一个氨基酸一般是蛋氨酸 ， 其氨基要甲酰化 ， 予以保护 。 氨基酰tRNA进入A位肽键的形成蛋白质合成的终止肽链的延伸
2.核酸技术
（1）PCR技术的基本原理：
PCR技术在模板DNA、dNTP、Mg2+、合适Buffer等条件下 ， 用耐热的Taq聚合酶代替DNA聚合酶 ， 用合成的DNA引物代替RNA引物 ， 经过DNA变性、引物与模板结合（复性）和延伸3个步骤的反复循环（25～30次）过程 ， 使目的DNA呈指数扩增 。
DNA模板的热变性：将待扩增DNA加热到94℃左右 ， 使双链DNA解开成为单链 ， 并
游离于反应体系中作为模板 。
模板与引物的结合（退火或复性）：将体系温度降至合适温度（52℃左右） ， 使加
入的引物与模板DNA两端（3ˊ端）碱基序列互补结合 。
引物延伸：将体系温度升到72℃左右 ， Taq聚合酶催化dNTP按碱基互补原则连接在
DNA引物3ˊ端 ， 使链延伸 ， 形成两条与模板互补的新链 。
参数
变性温度与时间：一般选择： 94℃ ， 30秒
退火温度与时间：取决于引物长度、浓度和G+C含量 ， 一般选择为Tm - 5℃
延伸温度与时间：一般选择： 70℃ ～75℃
循环次数：取决于模板浓度 ，一般循环：30次
[引物是根据已知序列的模板DNA待扩增区两端而设计的一对寡核苷酸小片断 ， 长度一般为15～30个碱基 。
RNA作为模板时 ， 需要：RNA cDNA PCR 称此为RT-PCR
（2）Southem印迹杂交法(Southern blot hybridization)
又称为Southern杂交 ， 即DNA-DNA杂交分析 。 是研究DNA图谱的基本技术 ， 主要用于基因组DNA的分析 ， 如在基因组中特异基因的定位及检测等 ， 亦可用于分析重组质粒和噬菌体 。 在遗传诊断DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值 。
提取DNA→限制性内切酶酶切→琼脂糖凝胶电泳→DNA用碱变性→变性的DNA转移
到硝酸纤维素膜→加入DNA探针→显影或显色检测杂交信号→证实DNA靶分子是
否含有目的基因片段 。
Northem印迹杂交法(Northern blot hybridization)
又称为Northern杂交 ， 即RNA-DNA杂交分析 。 是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法 。 主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的同一基因的表达情况 。
（1）检测mRNA长度分子量大小（依电泳迁移率估计）；
（2）mRNA的含量 ， 即基因表达高低 。 （密度扫描仪 ， 定量分析）
Northern杂交用于鉴定RNA 。 其基本原理与Southern杂交相同 ， 只不过变件方法不能采用碱变性法 ， 因为碱导致RNA水解 ， 一般采用聚乙二醛和二甲基亚矾、甲醛、甲基氢氧化汞等变性方法 。
[分子印迹技术-特点
1.预定性 ， 即它可以根据不同的目的制备不同的MIPs ， 以满足各种不同的需要 。
2.识别性 ， 即MIPS是按照模板分子定做的 ， 可专一地识别印迹分子 。
3.实用性 ， 即它可以与天然的生物分子识别系统如酶与底物、抗原与抗体、受体与激素相比拟 ， 但由于它是由化学合成的方法制备的 ， 因此又有天然分子识别系统所不具备的抗恶劣环境的能力 ， 从而表现出高度的稳定性和长的使用寿命.
（3）DNA测序（双脱氧法原理）
原理利用了DNA聚合酶所具有的两种催化反应特性：第一 ， DNA聚合酶能以单链DNA
为模板 ， 准确合成出DNA的互补链；第二 ， DNA聚合酶能以2′3′-双脱氧核苷三磷酸
为底物 ， 使之参入到寡核苷酸链的3′-末端 ， 从而终止DNA链的延长 。 [在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶. 测序时分成四个反应 每个反应除上述成分外分别加入23-双脱氧的A C G T核苷三磷酸(称为ddATP ddCTP ddGTP ddTTP) 然后进行聚合反应. 在第一个反应物中 ddATP会随机地代替dATP参加反应一旦ddATP加入了新合成的DNA链 由于其3位的羟基变成了氢 所以不能继续延伸. 所以第一个反应中所产生的DNA链都是到A就终止了; 同理第二个反应产生的都是以C结尾的; 第三个反应的都以G结尾 第四个反应的都以T结尾电泳后就可以读出序列了
3.基因表达的特点（时空特异性）
基因表达(gene expression)是指基因的遗传信息经过转录、转译等极其复杂的生物化学反应 ， 最终产生具有生物功能的蛋白质的过程 ， 即DNA→RNA→蛋白质 。
基因表达是受调控的
时间特异性
按功能需要 ， 某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生 ， 称之为基因表达的时间特异性(temporal specificity) 。 多细胞生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性(stage specificity) 。
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