Lumiprobe 自由基分析丨H2DCFDA说明书
艾美捷LumiprobeH2DCFDA(2'7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯)是一种常用试剂 , 用于研究活细胞中活性氧的产生 。
H2DCFDA是一种非荧光荧光素衍生物(其还原乙酰化形式) 。 该试剂仅在乙酰基裂解和试剂在细胞中氧化并转化为2'7'-二氯荧光素后才开始发射荧光 。 这是一种亮绿色荧光染料(最大吸收511 nm , 最大荧光533 nm) 。 该试剂可用于活细胞中的测定 , 与样品固定不兼容 。
H2DCFDA中的乙酰基增加其亲脂性并改善其细胞膜通透性 。 一旦进入细胞 , 染料就会被细胞酯酶脱乙酰化 , 从而带电并更好地固定在细胞内 。 活性氧形式的氧化导致荧光产物(2'7'-二氯荧光素)的形成 , 并且可以使用各种方法检测 , 例如使用流式细胞仪、读板器或荧光显微镜 。
使用艾美捷LumiprobeH2DCFDA的建议:
使用新配制的试剂溶液(工作溶液不适合长期储存 , 因为试剂会逐渐氧化) 。
针对特定细胞系和测定条件 , 选择试剂脱乙酰和氧化所需的最佳试剂工作浓度和孵育时间 。 如果没有针对特定细胞系推荐的方案 , 则从 1到10μM的浓度开始并孵育30分钟 。
不要在存在血清的情况下将染料与细胞一起孵育 , 因为它含有切割 H2DCFDA的酶 。
【Lumiprobe 自由基分析丨H2DCFDA说明书】艾美捷LumiprobeH2DCFDA化学性质:
形态: 无色固体
分子量: 487.29
CAS号: 4091-99-0
分子式: C 24 H 16 Cl 2 O 7
IUPAC名称:2-(36-二乙酰氧基-27-二氯-9H-xanthen-9-yl)苯甲酸
溶解度: 良好的 DMSO、乙醇和DMF
质量控制:NMR 1 H HPLC-MS (95%)
储藏条件:-20°C避光条件下交货后12个月 。 运输:在室温下长达3周 。 防潮 。 避免储存不受光照和不必要的原液冻融循环 。 如果试剂多次使用 , 强烈建议将其储存在干燥的氩气或氮气气氛中 。
光谱特性
最大激发/吸收 , nm: 511
ε L?mol -1?cm -1: 118626
最大发射 , 纳米: 533
荧光量子产率: 0.76
CF 260: 0.17
CF 280: 0.14
艾美捷LumiprobeH2DCFDA相关研究:
BDP 493/503脂质染色剂
BDP 493/503是一种亲脂性绿色荧光染料 , 用于细胞膜、脂质和油脂的染色和追踪 。
BDP 630/650马来酰亚胺
BDP 630/650马来酰亚胺是一种硫醇反应性、基于硼二吡咯亚甲基的染料 , 经过调整以匹配Cyanine5荧光团的远红通道 。
花青3酰肼
Cyanine3 hydrazide是Cy3通道的羰基反应性染料 。
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