酶法怎么用？《动脉粥样硬化》 酶法
1．原理
磷脂酶D因特异性不高，能水解血清中卵磷脂，溶血卵磷脂和神经磷脂（三者占血清总磷脂的95%），释放出胆碱，胆碱在胆碱氧化酶作用下生成甜菜碱和H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]，在过氧化物酶作用下，H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]，4-氨基安替比林、酚发生反应生成红色醌亚胺化合物，其颜色深浅与这三种磷脂的含量成正比，在500nm波长下比色计算结果为：
2．试剂
（1）酶应用液（参考配方）：每100mlTris-His缓冲液（50mmol/L，pH7.8）中含：
磷脂酶D45U胆碱氧化酶100U过氧化物酶220U4-氨基安替比林12mg酚20mgCaCl[XB]2[/XB]·2H[XB]2[/XB]O8mgTritonX-1000.2g
(2)标准液：纯卵磷脂，临用前配制，5mg/2.5ml蒸馏水（含TritonX-1000.5%）
3．操作
（1）标本采集：空腹12h抽静脉血，不抗凝，分离血清或抗凝血分离血浆 。
（2）在3.0ml酶应用液中加入血清（浆）20μl，标准管加标准液20μl，空白管加水20μl，放置37℃水浴10min后，波长500nm，比色，空白管液调零 。
4．计算
血清磷脂（mg/dl）=TA/SA×200
血清磷脂（mmol/L）=血清磷脂（mg/dl）×0.01292
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