答一：蛋白酶体——细胞的废物处理机器 。 蛋白酶体包括两种形式:20S复合物和26S 复合物而26S复合物又由20S 复合物和19S 复合物组成主要负责依赖泛素的蛋白质降解途径 。 26S 复合物是一种筒状结构 活性部位(20S 复合物) 在筒内能将所有蛋白质降解成含7 个～9 个氨基酸的多肽 。 蛋白质要到达活性部位一定要经过一种被称为“锁”(lock) 的帽状结构(19S 复合物) 而这个帽状结构能识别被泛素标记的蛋白质 。 被降解蛋白质到达活性部位后泛素分子在去泛素酶的作用下离去能量(ATP) 被释放出来用于蛋白质的降解 。 降解后的多肽从蛋白酶体筒状结构另一端被释放出来 。 其实蛋白酶体本身不具备选择蛋白质的能力只有被泛素分子标记而且被E3 识别的蛋白质才能在蛋白酶体中进行降解 。
答二：通过泛素-蛋白酶体途径降解蛋白质是个ATP依赖的过程 ， 通常包含两个步骤：1）蛋白质底物和多泛素分子通过共价键相连；2）有265蛋白酶复合体的作用降解被标记的底物 ， 释放游离的和可再利用的泛素 。
1.泛素与蛋白质结合：1）泛素活化酶E1在ATP的参与下生产一个高能硫羟酸酯键 ， 形成一个E1-S-泛素的复合体；2）泛素从E1被转移到泛素结合酶E2的硫羟酸酯中间体上 ， 形成第二个复合体E2-S-泛素；3）E2在泛素与底物蛋白之间催化形成异肽键而将泛素转移到底物蛋白上 ， 在反应过程中 ， E2可直接识别底物蛋白 ， 但多数情况下需要泛素蛋白连接酶E3参与 。 E3催化结合过程中的最后一步 ， 即泛素和底物通过共价键相连接 。 随后通过连续添加活化的泛素至先前连接上去的泛素分子上以形成一条多聚泛素链 。 此链被26S蛋白酶体复合物所识别 。
2.蛋白酶体和泛素化底物的降解 1）蛋白酶体与降解机制：蛋白酶体与降解机制：蛋白酶体是一个26S多催化的物质 ， 具有酶活性 。 它由多聚泛素所标记的蛋白质降解至小的肽 。 蛋白酶体由2个亚基复合体组成：①具有催化活性的20S核心颗粒 ， 在α环上开个口以便让底物进入核心颗粒以达到催化降解的目的 。
②具有调控功能的19S亚复合体 ， 识别泛素化的蛋白质和蛋白酶体可识别的其他底物 。
4.卵母细胞成熟的标志是什么？
形态学：
核膜破裂又称生发泡破裂（GVBD）染色体凝聚 ， 纺锤体形成和第一极体排除 ， 停顿在第二次减数分裂中期 。
分子水平上：
卵母细胞内cAMP浓度下降 ， Ca2+浓度上升 ， 蛋白质合成增加 ， 蛋白质去磷酸化或磷酸化 ， 促成熟因子之类（ MPF）的生物活性物质出现 。
5.影响精子获能的因素有哪些？
（1）、获能精子中蛋白激酶活性的改变影响获能 。 依赖cAMP的PKA ， 磷脂激活的蛋白激酶（PKC）以及酪氨酸激酶 。 佛波脂刺激PKC可加速精子的获能 。
（一）PKA
在小鼠精子获能期间 ， 腺苷酸环化酶活性和cAMP合成均增加 。 精子cAMP水平上升依赖于细胞外基质中Ca2+和HCO3-的存在 ， PKC的抑制物和Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶对cAMP浓度没有影响 。
（二）PKC
PKC参与精子运动和顶体反应的调控 。 佛波脂（phorbolesters）刺激PKC可加速精子的获能 ， 这一反应可被PKC的抑制物所抑制 。
（三）酪氨酸激酶
体外实验表明小鼠附睾精子在获能时 ， 其蛋白的酪氨酸磷酸化的增加依赖依赖于培养基中的BSA、Ca2+和碳酸盐 ， 这些因子诱发获能完全依赖于cAMP 。
（2）、源于雄性生殖道的受精促进肽 。 受精促进肽可以实现获能反应和提高受精/穿透能力 。 腺苷能调节腺苷酸环化酶的活性 ， 对获能和未获能的两种精子产生的作用与FPP作用相似 。 FPP和腺苷合并使用比单独好 。
6.哺乳动物卵母细胞成熟排卵的方式有哪些？ADAM/DMC蛋白家族成员及其蛋白结构特点？
（1）、排卵通过交配生理活动的刺激完成 。 对子宫颈的生理刺激导致垂体释放促性腺激素 ， 由激素指导交配形成受精卵 ， 如家兔、水貂等动物采用这种方式 。
（2）、大多数哺乳动物采用周期性排卵的方式 。 雌体只在一年中某特定的动情期排卵 。 动情和排卵基本上是同步发生的 。
ADAM/DMC蛋白家族成员有EAP-1、MDC、α-fertilin和β-fertilin 。 ADAM/MDC成员具有一些保守的功能域 ， 从氨基酸端起依次包括：信号肽 ， 前体区、金属蛋白酶区、整联蛋白配体区、半胱氨酸富集、表皮生长因子样重复区、跨膜区和胞内肽尾区 。 其成员有EAP-1其表达依赖于雄性激素 ， 分布在附睾上皮细胞顶表；MDC ， 一种乳腺癌肿瘤的阻遏因子 。
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