一、标记基因和报告基因的概念
标记基因(marker gene) , 是一种已知功能或已知序列的基因 , 能够起着特异性标记的作用 。 标记基因是选择标记基因的简称 , 是指其编码产物能够使转化的细胞、组织具有对抗生素等的抗性 , 或者使转化细胞、组织具有代谢的优越性 。 在培养基中加入抗生素等选择试剂的条件下 , 非转化的细胞死亡或生长受到抑制 , 而转化的细胞能够继续存活 , 从而将转化的细胞、组织从大量的细胞或组织中筛选出来的一类基因 。 在基因工程意义上来说 , 它是重组DNA载体的重要标记 , 通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说 , 它是对目的基因进行标志的工具 , 通常用来检测目的基因在细胞中的定位 。
报告基因(reporter gene) , 是指其编码产物能够被快速地测定 , 常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官 , 并检测其表达活性的一类特殊用途的基因 , 主要用于判断目的基因是否成功导入到受体细胞 , 并在其中表达 。 故当报告基因被用来区分转化和非转化细胞、组织、器官时 , 也可将其称为标记基因 。 报告基因不仅能作为标记基因 , 此外 , 报告基因还能用于研究基因的表达调控 , 检测启动子的活性 , 发现新的启动子 , 观察报告基因和目的基因的融合蛋白在细胞内的位置等 。
二、标记基因和报告基因的区别与联系
二者的联系在于:报告基因都可以看做是标记基因 。 报告基因也有标记的作用 , 标记目的基因是否成功
转化的作用 , 但是它们又有着各自的特点 。
标记基因通常用来检验重组DNA载体转化成功与否 , 或者检测目的基因在植物细胞或组织中的定位 。 常用的标记基因是一些抗生素抗性基因 , 如卡那霉素抗性基因、潮霉素标记基因等 。
而作为报告基因 , 在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件:1)已被克隆和全序列已测定;2)表达产物在受体细胞中不存在 , 即无背景 , 在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物;3)表达产物唯一 , 对受体细胞无毒 , 并且能进行定量测定 。 目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、荧光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、分泌型碱性磷酸酶基因(seap)、绿色荧光蛋白基因(gfp)等 。
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【产物|知识分享:教你辨析标记基因和报告基因】
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